提供从样本RNA/DNA提取、反转录到qPCR检测的一站式服务，支持基因表达差异分析、miRNA表达检测、基因拷贝数测定、干扰效率评估等，SYBR Green与TaqMan探针两种方案可选。
qPCR（实时荧光定量PCR）是目前最主流的基因表达定量手段——在常规PCR体系中加入荧光信号，实时监测每一轮扩增循环产物量的变化，通过荧光信号达到检测阈值所需的循环数（Ct值），反推起始模板的相对/绝对含量。相比普通PCR只能定性判断"有没有扩增出来"，qPCR能给出有统计学意义的定量数字。
染料非特异性地嵌入所有双链DNA，成本低、操作简单，但特异性依赖引物设计，容易被非特异性扩增/引物二聚体干扰。
额外设计一条与目的序列特异性结合的荧光探针，特异性更高，适合多重检测（同一体系同时检测多个靶标），成本相对更高。
| 你的情况 | 建议方案 |
|---|---|
| 常规单基因表达检测，预算有限、希望快速出结果 | SYBR Green |
| 需要同一反应体系里同时检测多个靶标（多重PCR） | TaqMan探针 |
| 目标序列存在高度同源的相似序列，特异性要求很高 | TaqMan探针 |
| SNP分型、等位基因区分等需要极高特异性的场景 | TaqMan探针 |
相对定量（2⁻ΔΔCt法）：以内参基因（如GAPDH、β-actin）为标准，计算目的基因相对于内参、相对于对照组的表达倍数变化，是最常用的方式，适合"这个基因表达是升高了还是降低了、升高了多少倍"这类比较研究。绝对定量（标准曲线法）：需要已知浓度梯度的标准品建立标准曲线，能给出样本中目标序列的绝对拷贝数，适合病毒载量检测、基因拷贝数测定等需要精确绝对数值的场景。
PCR扩增早期，荧光信号强度还很微弱、被淹没在背景噪音中；随着循环数增加，扩增产物呈指数级增长，荧光信号逐渐超过设定的检测阈值——这个荧光信号首次超过阈值时对应的循环数，就是Ct值（Cycle threshold）。起始模板量越多，需要的扩增循环数越少就能达到阈值，Ct值越小；反之，起始模板量越少，Ct值越大。这个反向关系，就是qPCR定量的数学基础。
不同样本之间，加样量、RNA提取效率、反转录效率都可能存在细微差异，直接比较目的基因的Ct值并不公平。内参基因（管家基因，理论上在不同处理条件下表达量应保持稳定）的作用就是作为「标尺」，把目的基因的Ct值相对于内参基因做归一化处理，才能排除这些实验操作带来的系统误差，得到真正反映生物学差异的定量结果。
选用的内参基因本身，需要在你的实验处理条件下确认其表达量确实保持稳定——如果研究的处理因素恰好会影响这个"内参"的表达（比如某些应激处理会显著改变管家基因表达），会导致整个定量结果失真。建议根据具体研究背景选择合适的内参，必要时通过预实验验证内参稳定性。
SYBR Green方案下，扩增结束后的熔解曲线分析能帮助判断产物是否单一——如果出现多个熔解峰，说明存在非特异性扩增或引物二聚体，此时的Ct值和定量结果可信度会打折扣，需要重新优化引物或反应条件。
PCR理论上每一个循环模板量翻一倍，所以Ct值每相差1，对应的模板量大约相差2倍(2¹)；Ct值相差2，大约相差4倍(2²)，以此类推——这也是2⁻ΔΔCt计算公式背后的数学逻辑。
移液操作的微小误差、反应体系混匀程度、仪器孔位间的温度均一性等，都会带来技术性重复误差，这是实验操作的正常波动范围，因此qPCR实验通常要求技术重复(同一样本测多孔)，取平均值来降低这类随机误差的影响。
miRNA序列很短(约20-24nt)，常规引物设计方式很难直接应用，通常需要特殊的引物延伸或加尾策略(如茎环法反转录)才能满足qPCR对模板长度的基本要求，检测流程比常规mRNA qPCR多了额外的技术处理步骤。
当你需要知道“这个基因/miRNA的表达量到底变了多少”，而不只是“有没有变”时，qPCR是最常用的定量验证手段——回答“表达量变化有多大、是否有统计学意义”。
在PCR体系中加入荧光基团，通过实时监测每一循环扩增产物的荧光信号变化对起始模板定量。支持绝对定量（标准曲线法）与相对定量（内参基因归一化，常用2⁻ΔΔCt法）。
基因表达验证、干扰/过表达效率验证、拷贝数分析、病原检测等，是基因功能研究、分子机制研究中最常用的分子验证手段之一。
SYBR Green低成本快速 / TaqMan高特异性多重检测
常规检测周期明确，可预期排期
扩增曲线+溶解曲线+差异分析全套报告
标准曲线法或2⁻ΔΔCt法，按需求匹配
提交实验方案与目标
技术顾问确认工艺与周期
支付不低于50%项目启动款，正式排产
全流程质控留档
结清尾款，完成验收
标准订单及定制/大额订单均需支付不低于合同总额的50%作为项目启动款，剩余尾款支付时限根据具体项目另行约定。
客户收到产品或报告后，请于1个月内完成验收；如对交付结果有异议，请于此窗口期内提出，我们将在2个工作日内响应并协助处理。