提供从常规PCR引物到各类修饰引物的定制合成服务,采用固相亚磷酰胺三酯法合成,全程自动化质控,支持荧光标记、生物素修饰、磷酸化修饰等多种末端与内部修饰。
引物合成从3'端开始,逐个循环地把带保护基团的核苷酸亚磷酰胺单体,通过化学偶联反应连接到固相支持物上正在延伸的链上,每加一个碱基就要经历脱保护、偶联、氧化、封闭四个步骤,如此循环直到合成出完整长度的序列,最后从固相支持物上切割下来并脱除全部保护基团。
合成效率并非100%——每一步偶联都有极小概率失败,链越长,累积的失败概率越高,这也是为什么超长引物/探针的合成难度和成本会明显上升。
荧光标记、生物素修饰等末端修饰通常不影响引物的常规扩增功能,但如果是内部修饰(如内部荧光/生物素插入),可能影响聚合酶通读效率,需要结合具体应用场景评估修饰位置。
Tm值匹配、GC含量适中、避免引物二聚体和发夹结构、3'端避免连续多个相同碱基——这些经典设计原则即使在合成服务下单前也建议自行核对一遍,能有效减少后续实验中非特异性扩增的概率。
常规引物合成长度通常可覆盖到100nt以上,但序列越长、修饰越复杂,合成周期和失败率也会相应增加,具体上限建议咨询技术顾问确认。
除长度外,GC含量、是否含修饰基团、是否为高难度序列(如二级结构复杂的区域)都会影响合成难度和纯化步骤,进而影响实际交付周期。
几乎所有PCR相关实验的起点——当你需要扩增特定序列、进行测序验证或构建载体时,一对设计准确的引物是实验成败的基础——回答“怎么精确地把目标序列‘框’出来”。
基于固相亚磷酰胺化学法,在可控孔径玻璃(CPG)固相载体上,按3'→5'方向经"脱保护-偶联-加帽-氧化"四步循环逐一延伸核苷酸链,最后经切割、脱保护与纯化获得目标序列。
常规PCR/qPCR、Sanger测序、原位杂交探针、基因分型、文库构建接头等。
FAM/HEX/ROX/Cy3/Cy5荧光标记、生物素、磷酸化、地高辛标记
修饰引物3-5个工作日
提供合成报告与质谱/PAGE质检数据
PAGE/HPLC/Cartridge任选,匹配不同纯度需求
提交实验方案与目标
技术顾问确认工艺与周期
支付不低于50%项目启动款,正式排产
全流程质控留档
结清尾款,完成验收
标准订单及定制/大额订单均需支付不低于合同总额的50%作为项目启动款,剩余尾款支付时限根据具体项目另行约定。
客户收到产品或报告后,请于1个月内完成验收;如对交付结果有异议,请于此窗口期内提出,我们将在2个工作日内响应并协助处理。