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双荧光素酶报告基因
启动子活性 · 转录调控 · miRNA靶向

提供双荧光素酶报告基因检测服务,广泛用于启动子/增强子活性分析、转录因子与顺式元件结合验证、miRNA与靶基因3'UTR靶向关系验证等。

怎么用发光信号量化基因表达调控

核心原理
注意事项
小知识点

为什么是"双"荧光素酶

实验中同时使用两种不同来源、催化不同底物的荧光素酶:萤火虫荧光素酶(Firefly)的表达受目标调控元件(如候选启动子、3'UTR)控制,是真正的检测对象;海肾荧光素酶(Renilla)由不受实验处理影响的组成型启动子驱动,持续稳定表达,作为内参用于归一化转染效率等实验误差。最终以Firefly/Renilla的比值作为衡量目标调控元件活性的定量指标,这种双内参设计大幅提升了实验的可靠性和重复性。

不同实验目的,报告基因的构建方式不同

验证启动子/增强子活性时,通常将候选调控序列克隆到荧光素酶基因的上游;验证miRNA与靶基因3'UTR的靶向关系时,则是把靶基因3'UTR序列克隆到荧光素酶基因的下游,通过共转染miRNA mimic后观察荧光信号是否被显著抑制来判断靶向关系是否成立。构建方式需要根据具体研究问题确定,不能一概而论。

为什么miRNA验证实验通常还需要设置突变对照?

在靶基因3'UTR上的miRNA预测结合位点引入突变后,如果miRNA不再能显著抑制荧光素酶信号,说明之前观察到的抑制效应确实是通过这个特定结合位点介导的,而不是非特异性效应,这是miRNA靶向关系验证中常用的严谨对照设计。

荧光素酶信号强弱能直接反映启动子活性高低吗?

在做好内参归一化(Firefly/Renilla比值)且实验条件规范的前提下,可以合理反映相对活性强弱,但这仍然是一种体外报告系统的间接测量,最终结论建议结合内源基因表达水平等其他证据共同验证,而不是仅依赖报告基因实验单一结果下定论。

实验目的与应用场景

实验目的

当你想知道“这段启动子/UTR序列到底有没有转录调控活性”,或者“这个miRNA是否真的靶向这个基因”时,双荧光素酶实验是最直接的功能验证方式。

应用场景

技术原理与应用方向

技术原理

系统包含萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)与海肾荧光素酶(Renilla Luciferase)两个报告基因。将目标调控元件(如启动子、3'UTR)克隆至萤火虫荧光素酶上游,共转染以海肾荧光素酶作为内参。通过测定两者发光值的比值(Firefly/Renilla)校正转染效率差异,从而定量反映目标元件的转录调控活性。

应用方向

启动子功能分析、转录因子靶基因验证、miRNA-靶基因验证、信号通路激活检测等。

服务优势

双报告基因校正

萤火虫+海肾荧光素酶校正转染效率

常规2-3周

含载体构建、转染、检测全流程

定量数据交付

原始数据+统计分析+实验报告

多场景适配

启动子/转录因子/miRNA靶向均可

交付说明

双荧光素酶检测常规约2-3周
交付内容:原始数据、统计分析与实验报告;载体构建(启动子/3'UTR片段)建议提前与技术顾问确认序列设计。

订购流程

1

需求沟通

提交实验方案与目标

2

方案确认

技术顾问确认工艺与周期

3

预付下单

支付不低于50%项目启动款,正式排产

4

生产质控

全流程质控留档

5

交付验收

结清尾款,完成验收

付款与验收说明

项目启动款说明

标准订单及定制/大额订单均需支付不低于合同总额的50%作为项目启动款,剩余尾款支付时限根据具体项目另行约定。

验收说明

客户收到产品或报告后,请于1个月内完成验收;如对交付结果有异议,请于此窗口期内提出,我们将在2个工作日内响应并协助处理。

免责声明:本页面所示交付周期、技术参数为常规参考区间,具体以订单确认单为准。 ↑ 返回页面顶部
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