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免疫组化 IHC
目标蛋白原位表达与定位检测

提供石蜡/冰冻组织切片的免疫组化染色服务,检测目标蛋白在组织中的表达水平、分布与定位,支持单标与多标,可结合数字病理扫描与半定量分析。

怎么用颜色标出目标蛋白的位置

核心原理
注意事项
小知识点

核心原理:酶促显色反应

与免疫荧光的荧光信号不同,IHC通常使用携带辣根过氧化物酶(HRP)等酶标记的二抗,加入DAB等显色底物后,酶催化底物产生棕色沉淀,沉淀定位在目的蛋白所在的组织区域,可以直接在普通光学显微镜下观察,且染色后的切片可以长期保存、便于回顾性研究和数字化扫描归档。

抗原修复这一步不能省

石蜡包埋和固定过程中,甲醛交联可能掩盖部分抗原表位,导致抗体无法识别。染色前通常需要进行抗原修复(如高温高压柠檬酸盐缓冲液处理),暴露被掩盖的抗原表位,抗原修复方法和条件的选择直接影响染色成功与否。

半定量评分需要标准化

IHC结果的半定量分析(如染色强度评分、阳性细胞比例)容易受主观判读差异影响,建议采用标准化的评分标准(如H-score),并结合数字病理扫描等客观量化工具,提高不同批次、不同评估者之间结果的可比性和重复性。

IHC检测中出现背景染色过深,可能是哪里出了问题?

常见原因包括一抗浓度过高、内源性过氧化物酶未充分阻断、抗体孵育时间过长或温度过高、以及组织本身存在内源性生物素干扰等,需要结合阴性对照逐一排查具体环节。

为什么IHC评分经常需要两名以上病理医生独立判读?

IHC的染色强度和阳性比例判读存在一定主观性,不同判读者之间可能存在差异(观察者间变异),多人独立盲法评分后取一致性结果或平均值,是提高IHC半定量结果可靠性的常规做法,尤其在涉及临床或发表用途的研究中更为重要。

实验目的与应用场景

实验目的

当你需要在保留组织形态结构的前提下,观察目标蛋白在组织切片中的表达分布和强度时,IHC是病理与基础研究中最常用的手段——回答“这个蛋白在组织的哪些区域、表达多不多”。

应用场景

技术原理与应用方向

技术原理

以特异性抗体结合组织切片中的目标抗原,经酶(如HRP)标记的二抗与显色底物(如DAB)反应,在抗原表达部位形成可见的棕色沉淀,从而在保留组织形态的前提下实现蛋白的原位定位与表达评估。

应用方向

肿瘤标志物检测、蛋白组织表达谱、临床病理研究等。

服务优势

单标/多标均可

支持多靶点联合检测

常规2-3周

含染色、扫描、评分分析全流程

半定量评分分析

数字病理扫描+评分报告交付

保留组织形态

原位定位与表达评估同步实现

交付说明

免疫组化染色约2-3周
交付内容:染色切片、扫描图像与评分分析报告;抗体选择建议提前与技术顾问确认。

订购流程

1

需求沟通

提交实验方案与目标

2

方案确认

技术顾问确认工艺与周期

3

预付下单

支付不低于50%项目启动款,正式排产

4

生产质控

全流程质控留档

5

交付验收

结清尾款,完成验收

付款与验收说明

项目启动款说明

标准订单及定制/大额订单均需支付不低于合同总额的50%作为项目启动款,剩余尾款支付时限根据具体项目另行约定。

验收说明

客户收到产品或报告后,请于1个月内完成验收;如对交付结果有异议,请于此窗口期内提出,我们将在2个工作日内响应并协助处理。

免责声明:本页面所示交付周期、技术参数为常规参考区间,具体以订单确认单为准。 ↑ 返回页面顶部
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