提供从样本蛋白提取、SDS-PAGE电泳、转膜、抗体孵育到显影分析的完整WB服务，用于目的蛋白表达水平检测、翻译后修饰检测、蛋白分子量确认等。
mRNA水平的变化不完全等同于蛋白水平的变化——转录后调控、翻译效率、蛋白稳定性等环节都可能让两者出现不一致。Western Blot（蛋白免疫印迹）通过电泳分离蛋白、转膜、特异性抗体识别、化学发光显影，是目前验证目的蛋白是否表达、表达量高低、分子量是否正确最经典也最广泛认可的手段。
样本蛋白提取 → SDS-PAGE电泳分离（按分子量大小排开）→ 转膜（把凝胶上的蛋白转移到PVDF/NC膜上）→ 一抗孵育（识别目的蛋白）→ 二抗孵育（携带酶标记，识别一抗）→ 化学发光显影 → 灰度分析定量。每一步的实验质量都会影响最终结果的可靠性。
SDS-PAGE电泳的作用是先按分子量把样本中成千上万种蛋白质"排开"——SDS使蛋白质变性并均匀携带负电荷，电泳时蛋白质会按分子量大小在凝胶中迁移分离（分子量越小迁移越快）。只有先把目的蛋白和其他蛋白在空间上分开，后续的抗体识别才能准确对应到"这条带就是我要的蛋白"，而不是所有蛋白混在一起无法区分。
一抗直接特异性识别目的蛋白，但一抗本身通常没有可视化标记；二抗则特异性识别一抗（比如识别"兔来源的抗体"），并携带辣根过氧化物酶（HRP）等酶标记，加入化学发光底物后才能产生可被检测的光信号。这种两步法的好处是信号可以被放大（多个二抗结合到同一个一抗上），提高检测灵敏度。
跟qPCR类似，WB也需要内参蛋白（如GAPDH、β-actin、Tubulin）做上样量归一化，选择时同样要确认该内参在你的实验处理条件下表达确实稳定，且分子量与目的蛋白有足够区分度，避免条带重叠干扰判读。
WB实验中出现非特异性条带（除目的分子量外还有其他杂带）是很常见的问题，可能来自抗体本身特异性不足、蛋白降解、或者存在同源蛋白交叉反应，遇到杂带不必立即断定实验失败，建议结合阳性/阴性对照综合判断目的条带。
WB的灰度分析本质是半定量而非精确定量，容易受曝光时间、显影条件等因素影响，同一批次内的相对比较相对可靠，但不同批次之间的绝对灰度值直接比较意义有限，建议同一批实验设置统一的对照和曝光条件。
可能的原因包括：蛋白提取效率不足(尤其是膜蛋白等难提取蛋白)、上样量不够、目的蛋白丰度本身很低超出检测灵敏度、抗体特异性不匹配实验条件(如变性状态下表位被破坏)等，需要逐一排查而不是简单归结为“没表达”。
不一定。翻译后修饰(如糖基化、磷酸化)会增加实际迁移分子量；蛋白酶切、剪接变体等也会导致实际条带位置与理论氨基酸序列计算出的分子量不完全一致，这属于正常的生物学现象，需要结合已发表文献或额外实验确认。
湿转(浸没在转膜缓冲液中电转)转膜效率更高、更适合大分子量蛋白，但耗时更长；半干转速度快、操作简便，但对大分子量蛋白转膜效率相对较低，具体选择通常根据目的蛋白分子量和实验室常规流程决定。
mRNA水平的变化不等于蛋白水平的变化，当你需要在蛋白层面验证表达量或修饰状态时，Western Blot是最经典的手段——回答“蛋白到底表达了没有、有多少”。
蛋白样品经SDS-PAGE按分子量分离后电转至PVDF/NC膜，经封闭后与特异性一抗结合，再以HRP偶联二抗孵育，通过ECL化学发光显影；以β-actin/GAPDH等作内参归一化，实现目的蛋白的半定量分析。
基因功能研究中的蛋白验证、信号通路研究、抗体特异性验证等，常与qPCR配合作为分子层面的双重验证。
提取-电泳-转膜-孵育-显影全程规范操作
常规检测周期明确
条带图+灰度分析，内参归一化半定量
过表达/敲低/敲除效果验证、通路研究均可覆盖
提交实验方案与目标
技术顾问确认工艺与周期
支付不低于50%项目启动款，正式排产
全流程质控留档
结清尾款，完成验收
标准订单及定制/大额订单均需支付不低于合同总额的50%作为项目启动款，剩余尾款支付时限根据具体项目另行约定。
客户收到产品或报告后，请于1个月内完成验收；如对交付结果有异议，请于此窗口期内提出，我们将在2个工作日内响应并协助处理。