基于体外转录(IVT)技术,合成mRNA、sgRNA、siRNA、lncRNA等多种功能性RNA,支持5'加帽、3' PolyA加尾及假尿嘧啶等修饰碱基掺入,提升稳定性与翻译效率。
以线性化的DNA为模板,利用T7/T3/SP6等噬菌体RNA聚合酶,在体外反应体系中按照模板序列合成对应的RNA分子。相比细胞内转录,体外转录反应条件更单一可控,能够高效大量地合成目标RNA。
5'帽子结构是真核细胞识别mRNA、启动翻译的关键信号;3' PolyA尾巴能提升mRNA在细胞内的稳定性,延缓降解;假尿嘧啶等修饰碱基的掺入,能降低mRNA被细胞天然免疫系统识别、从而被过早清除的概率,同时也有助于提升翻译效率。
mRNA通常需要完整的加帽加尾及修饰碱基处理才能在细胞内稳定发挥功能;而siRNA、sgRNA等小分子RNA的功能机制不同,通常不需要加帽加尾,但可能需要特定的化学修饰来提升稳定性或降低脱靶效应,具体方案需要根据RNA类型和应用场景确定。
体外转录反应体系中除了目标RNA产物,还残留有未反应的核苷酸、DNA模板、双链RNA副产物等杂质,双链RNA副产物尤其容易触发细胞的天然免疫反应,因此后续纯化步骤对于获得高质量、低免疫原性的RNA产物非常关键。
不一样。mRNA通常长度更长(几百到几千个碱基)且需要复杂的加帽加尾修饰;sgRNA相对短小(约100nt左右),修饰需求也更简单,两者在合成规模、纯化策略和质控标准上都有区别。
当你需要现货siRNA、miRNA mimics/inhibitor或其他功能性RNA,但不想走质粒构建再体外转录这条更长的路径时,直接化学合成RNA能大幅缩短获取周期——回答“怎么最快拿到我要的这段RNA”。
以T7/T3/SP6 RNA聚合酶为核心,体外转录模板DNA生成RNA链;修饰碱基通过转录反应中替代天然核苷三磷酸(NTP)掺入;加帽可通过共转录法(ARCA类似物)或转录后酶法(加帽酶+2'-O-甲基转移酶)实现;产物经DNase消化去除模板、纯化与质检确认完整性与纯度。
mRNA疫苗/治疗性mRNA研究、CRISPR sgRNA体外递送、siRNA基因沉默、RNA结构与功能研究等。
Cap0/Cap1加帽、PolyA加尾、假尿嘧啶(Ψ)/N1-甲基假尿嘧啶掺入
交付浓度与完整性质检报告
变性电泳/毛细管电泳确认完整性与纯度
mRNA疫苗研究、sgRNA递送、siRNA沉默等
提交实验方案与目标
技术顾问确认工艺与周期
支付不低于50%项目启动款,正式排产
全流程质控留档
结清尾款,完成验收
标准订单及定制/大额订单均需支付不低于合同总额的50%作为项目启动款,剩余尾款支付时限根据具体项目另行约定。
客户收到产品或报告后,请于1个月内完成验收;如对交付结果有异议,请于此窗口期内提出,我们将在2个工作日内响应并协助处理。