流式细胞术（Flow Cytometry, FACS）能让细胞逐个通过激光检测区域，在极短时间内同时测量每个细胞的多个物理和荧光特征（大小、内部颗粒度、多种荧光染料标记的分子），实现单细胞水平、大样本量（通常上万个细胞）的高通量多参数定量分析，是研究细胞异质性、细胞亚群组成不可替代的工具。
细胞周期分析（区分G1/S/G2-M期细胞比例）、凋亡检测（Annexin V/PI双染区分早期凋亡、晚期凋亡、坏死细胞）、细胞表面/胞内标志物检测（免疫细胞亚群分型）、细胞增殖检测（如CFSE稀释法）等，覆盖了从基础机制研究到免疫学表型分析的广泛场景。
| 你想知道 | 建议方案 |
|---|---|
| 处理后细胞是否更多地停滞在某个周期阶段 | PI单染细胞周期分析 |
| 细胞是走向凋亡还是坏死，处于早期还是晚期 | Annexin V/PI双染 |
| 混合细胞群体中不同免疫细胞亚群各占多少比例 | 表面标志物多色荧光抗体染色 |
| 细胞增殖了几代、增殖速率如何 | CFSE等增殖示踪染料 |
同时使用多种荧光标记时，不同荧光素的发射光谱可能存在重叠（光谱溢出），需要通过补偿（Compensation）校正才能准确区分各个通道的真实信号，荧光素组合方案设计得越复杂（多色标记），补偿设置的难度和实验设计的严谨度要求也越高。
细胞悬液中的每个细胞逐一通过激光照射区时，前向散射光（FSC，Forward Scatter）强度大致反映细胞的相对大小；侧向散射光（SSC，Side Scatter）强度反映细胞内部结构的复杂程度/颗粒度（如细胞器丰富程度）。通过FSC-SSC二维图，通常就能初步区分不同类型的细胞群体（如淋巴细胞、单核细胞、粒细胞在血液样本中会呈现出不同的散射特征分布）。
荧光标记的抗体或染料结合到细胞表面/内部的特定分子后，经激光激发产生荧光信号，光电倍增管将光信号转换为电信号并放大，最终以数字形式记录每个细胞在各个荧光通道的信号强度。软件对上万个单细胞的数据进行统计，生成直方图、二维散点图等，呈现整个细胞群体在各参数上的分布情况。
流式检测要求样本是分散良好的单细胞悬液，如果存在细胞聚集、贴壁组织消化不充分等问题，会严重干扰检测结果的准确性，实体组织样本尤其需要注意消化和过滤步骤的规范操作。
数据分析时如何逐层设门（先排除死细胞和碎片、再圈定目标细胞群体、再细分亚群）会直接影响最终得出的比例数据，不合理的门控策略可能引入较大的分析偏差，建议在实验设计阶段就明确门控逻辑，并设置合理的对照（如同型对照、FMO对照）辅助判断。
通常：Annexin V-/PI-代表活细胞；Annexin V+/PI-代表早期凋亡细胞(细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻但膜完整性尚存)；Annexin V+/PI+代表晚期凋亡/坏死细胞(膜完整性已丧失)；Annexin V-/PI+则通常视为机械损伤等非凋亡性死亡，较少见。
同型对照使用与检测抗体相同种属、相同亚型但不针对任何已知抗原的抗体，用于评估抗体的非特异性结合背景，帮助确定“阳性信号”和“背景噪音”之间的界限，避免把非特异性染色误判为真实的阳性信号。
常规流式细胞术(分析型)只做检测分析，不改变细胞的物理状态；流式分选(FACS，严格意义上这个缩写专指分选型)在检测的同时，还能根据设定的参数将特定细胞亚群实时物理分离收集出来，用于后续培养或其他下游实验，两者虽然常被混用称呼，但功能定位不同。
当你需要在单细胞水平，同时分析细胞的多个特征（大小、颗粒度、多种荧光标志物）时，流式细胞术能提供高通量的定量数据——回答“这群细胞里，不同亚群、不同状态的细胞各占多少”。
细胞经荧光标记后逐个通过激光检测区，依据前向散射（FSC，反映大小）、侧向散射（SSC，反映内部颗粒度）及荧光信号，对细胞群体进行多参数定量分析与分选。
凋亡/周期研究、免疫细胞分型、干扰/过表达表型分析等。
细胞大小/颗粒度/荧光信号同步分析
含染色、上机、数据分析全流程
流式图+统计分析一并交付
凋亡周期/免疫分型/表型验证
提交实验方案与目标
技术顾问确认工艺与周期
支付不低于50%项目启动款，正式排产
全流程质控留档
结清尾款，完成验收
标准订单及定制/大额订单均需支付不低于合同总额的50%作为项目启动款，剩余尾款支付时限根据具体项目另行约定。
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